国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > 人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)
產(chǎn)品目錄
人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)
更新時(shí)間:2018-08-14 點(diǎn)擊量:2034

人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞(CCRF-CEM)

貨號(hào):HIMCL-049

 

細(xì)胞介紹

G.E. Foley 等人建立了類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株CCRF-CEM。細(xì)胞是1964年11月從一位四歲白人女性急性淋巴細(xì)胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。

 

細(xì)胞特性

1) 來(lái)源:白血病, 急性淋巴細(xì)胞白血病, 外周血, T淋巴母細(xì)胞

2) 形態(tài)淋巴母細(xì)胞

3) 含量:>1x106 個(gè)/mL

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:1干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;2存活細(xì)胞收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

 

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

                       

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)。液氮儲(chǔ)存。

二. 細(xì)胞處理

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或將細(xì)胞懸液加入10cm皿中,加入8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2

2. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對(duì)于懸浮細(xì)胞傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,凍存管中加入10%DMSO進(jìn)行凍存。

 

注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

 

人甲狀腺癌細(xì)胞(B-CPAP)培養(yǎng)說(shuō)明書 
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (bEnd.3)細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

国产欧美日韩精品一区在线-久久精品视频免费获取地址| 三级a级一级大片在线观看-日韩av有码免费观看| 日本女优一卡二卡在线观看-欧美大胆a级视频秒播| sobo欧美在线视频-免费av网址一区二区| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| 99在线免费观看视频-丰满人妻一区二区三区视频53| 婷婷亚洲欧美综合丁香亚洲-超刺激国语对白在线视频| 欧洲精品一区二区三区中文字幕-91久久国产综合久久蜜月精品| 婷婷人妻少妇激情在线-欧美日韩人体艺术一区二区| 亚洲另类熟女国产精品-懂色一区二区三区在线播放| 精品一区二区三区av在线-欧美黑人巨大精品一区二区| 亚洲综合av一区二区三区-高潮又爽又黄无遮挡激情视频| 久久蜜桃精品一区二区-麻豆视频啊啊啊好舒服| 国产美女裸露无遮挡双奶网站-国产精品色午夜视频免费看| 欧美精品午夜一二三区-a屁视频一区二区三区四区| 欧美看片一区二区三区-人妻无卡精品视频在线| av一区免费在线观看-中文字幕日韩国产精品视频| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 精品亚洲卡一卡2卡三卡乱码-一区三区二插女人高潮在线观看| 亚洲欧美激情自拍色图-国产亚洲精品sese在线播放| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区| 亚洲综合久久综合激情-日韩欧美精品人妻二区少妇| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 国产日韩电影一区二区三区-美女露双奶头无遮挡物| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 亚洲av日韩五月天久热精品-国产日韩欧美一区二区三区群战| 在线观看中午中文乱码-2021国产一级在线观看| 激情字幕久久久字幕中文-一区二区三区免费黄片| 麻豆久久国产精品亚洲-日本理论中文字幕在线视频| 女主播啪啪大秀免费观看-精品99午夜福利影院| 欧美一区二区三区调教视频-三上悠亚国产精品一区二区三区| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| 久久蜜桃精品一区二区-麻豆视频啊啊啊好舒服| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放| 亚洲黑人欧美一区二区三区-亚洲一区二区三区免费视频播放| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区|