国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁技術中心 > 人P-糖蛋白(P-gp)elisa試劑盒說明書
產(chǎn)品目錄
人P-糖蛋白(P-gp)elisa試劑盒說明書
更新時間:2012-08-14 點擊量:2105

人P-糖蛋白(P-gp)elisa試劑盒說明書

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中P-糖蛋白(P-gp)的含量??擅赓M代測服務。

實驗原理

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本P-糖蛋白(P-gp)水平。用純化的P-糖蛋白(P-gp)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入P-糖蛋白(P-gp),再與HRP標記的P-糖蛋白(P-gp)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P-糖蛋白(P-gp)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人P-糖蛋白(P-gp)濃度。

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品:270μg/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

標準品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃保存

酶標試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

20倍濃縮洗滌液

20ml×1

30ml×1

2-8℃保存

樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/font>2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180μg/L,120μg/L ,60μg/L,30μg/L,15μg/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項:

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請避光保存。

7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  

  

                                              

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。

2.批內與批見應分別小于9%11%

            

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個月

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

日本亚洲精品中字幕日产2020-很黄很黄的裸交视频网站| 亚洲另类熟女国产精品-懂色一区二区三区在线播放| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 亚洲综合av一区二区三区-高潮又爽又黄无遮挡激情视频| 青木玲高清中文字幕在线看-视频在线免费观看你懂的| 国产精品久久99精品毛片-国产四季高清一区二区三区| 欧美日韩黑人在线播放-51在线精品免费视频观看| 黑丝av少妇精品久久久久久久-中文字幕久久久人妻无码| 日本中文字幕永久在线人妻蜜臀-欧美一区二区的网站在线观看| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 青青草原免费国产在线视频-精品人妻乱码一区二区三区四区| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放| 久久特一级av黄色片-91社区视频免费观看| 欧美看片一区二区三区-人妻无卡精品视频在线| 欧美日韩国产综合四区-爆操极品尤物熟妇14p| 婷婷人妻少妇激情在线-欧美日韩人体艺术一区二区| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| 欧美aa一级视频播放-久一一区二区三区大香蕉| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| av噜噜国产在线观看-欧美视频亚洲视频一区二区三区| 午夜福利院免费在线观看-久久精品日产第一区二区三区画质| 在线国产自偷自拍视频-蜜桃a∨噜噜一区二区三区| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 免费av一区在线观看-国产精品视频高潮流白浆视频免费| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 交换朋友的妻子中文字幕-日本美女8x8x8x8| 国内精产熟女自线一二三区-六月丁香婷婷在线观看| 婷婷人妻少妇激情在线-欧美日韩人体艺术一区二区| 人妻日韩精品中文字幕图片-麻豆极度性感诱人在线露脸| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 亚洲欧美激情自拍色图-国产亚洲精品sese在线播放| 日本欧美在线视频观看-国产一区二区三区无码下载快播| 久久亚州天堂一区二区-色噜噜色哟哟一区二区三区| hd在线观看一区二区-免费一区二区三区毛片在线| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 小12萝自慰喷水亚洲网站-chinese偷拍一区二区三区| 欧美mv日韩mv视频-熟妇人妻ⅴa精品中文| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放|