国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > ELISA(實(shí)驗(yàn)條件 技術(shù)要點(diǎn) 原理)
產(chǎn)品目錄
ELISA(實(shí)驗(yàn)條件 技術(shù)要點(diǎn) 原理)
更新時(shí)間:2011-09-09 點(diǎn)擊量:1238

ELISA實(shí)驗(yàn)條件 技術(shù)要點(diǎn) 原理)

 

實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn):

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,簡(jiǎn)稱ELISA)與免疫酶測(cè)定等名稱所指的內(nèi)容是不相同的,ELISA的內(nèi)容專指固相吸附技術(shù)和免疫酶標(biāo)抗體(或抗原)技術(shù)相結(jié)合的一種方法,它是將抗原或抗體包被在固相支持物(或稱載體上),然后再進(jìn)行免疫反應(yīng),形成酶標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物,反應(yīng)完畢,借助底物顯示特異結(jié)合的標(biāo)記抗體(或抗原)上的酶活性,用酶與底物反應(yīng)后生成的有色產(chǎn)物進(jìn)行光密度測(cè)定,達(dá)到抗原或抗體定量的目的。

在應(yīng)用ELISA時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測(cè)抗體還是抗原?2,檢測(cè)的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測(cè)特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?

(1)檢測(cè)抗原  zui常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法,其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。

(2)檢測(cè)抗體  檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgAIgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體,接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單,但不適用于檢測(cè)其他種類的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺?/span>IgG存在將與IgMIgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。

競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗體有兩種方法:一種是將標(biāo)記的抗體和標(biāo)本同時(shí)加入反應(yīng)孔內(nèi),但標(biāo)記的抗體和標(biāo)本中的抗體必須是結(jié)合抗原的不同決定簇;另一種是先加標(biāo)本,沖洗后再加標(biāo)記的抗體。競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗體比間接法容易判斷結(jié)果,并且比較敏感和特異。不論選擇哪種方法,ELISA都包括6個(gè)步驟:1,抗原或抗體吸附于固相;2.加標(biāo)本和試劑;3,孵育和沖洗;4,加酶標(biāo)抗原或抗體;5,加適當(dāng)?shù)牡孜铮?/span>6,檢測(cè)和分析結(jié)果。

雖然ELISA法在理論上十分簡(jiǎn)單,但每一步都有要注意的事項(xiàng)。不論是新設(shè)計(jì)的ELISA還是沿用其他ELISA方法都有以下幾方面技術(shù)要點(diǎn):固相載體的選擇和試劑的制備,反應(yīng)條件和操作的標(biāo)準(zhǔn)化。酶標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)法利用混合的未標(biāo)記抗原和酶標(biāo)記抗原相互競(jìng)爭(zhēng)抗體上的結(jié)合點(diǎn),從而進(jìn)行抗原的定量。未標(biāo)記抗原的量越大,則酶標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制。但是競(jìng)爭(zhēng)法在實(shí)驗(yàn)時(shí)比較復(fù)雜,有時(shí)在抗原混合液與相應(yīng)抗體孵育后,在測(cè)定游離抗原與抗體相結(jié)合抗原的活性以前,要先進(jìn)行鹽析或有機(jī)溶劑沉淀或第二抗體沉淀等方法把兩種不同存在形態(tài)的抗原分開(kāi)。并且在加入底物后,容易產(chǎn)生血清色的物質(zhì)。因此,每次測(cè)定時(shí)都需做空白對(duì)照。由于這些缺點(diǎn),酶標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)法使用不多。

 

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

男人的天堂久久精品激情-最新亚洲精品a国产播放| 亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| 18禁真人在线无遮挡羞免费-中文字幕精品一区二区三区四区| 国产av一区二区三区日韩接吻-av网址在线播放网站| 婷婷亚洲欧美综合丁香亚洲-超刺激国语对白在线视频| 久久影视av一区二区-人妻激情乱偷一区二区三区| 99在线免费观看视频-丰满人妻一区二区三区视频53| 熟女熟妇伦51788-国产av在线播放一区二区三区| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 色噜噜噜噜一区二区三区-欧美最猛黑人做爰视频| 免费av一区在线观看-国产精品视频高潮流白浆视频免费| 色婷婷六月婷婷一区二区-91草草国产欧美在线观看| 熟女少妇免费一区二区-麻豆一区二区三区免费在线观看| 人妻日韩精品中文字幕图片-麻豆极度性感诱人在线露脸| 可以免费看污污视频的网站-日韩欧美不卡视频在线观看| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 午夜福利卫生纸福利院-一区二区三区久久亚洲| 日本少妇激情一区二区-亚洲自偷自拍熟女另类蜜臀| 亚洲中文一二三av网-亚洲天堂成人免费在线| 亚洲综合久久综合激情-日韩欧美精品人妻二区少妇| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 国产小黄片高清在线观看-涩涩鲁精品亚洲一区二区| 91蜜桃传媒一二三区-日韩欧美国产一区呦呦| 久久影视av一区二区-人妻激情乱偷一区二区三区| 欧美日韩国产在线资源-超碰成人国产一区二区三区| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 人妻少妇无乱码中文字幕-人成免费视频一区二区| 国产av剧情护士麻豆-三级国产精品欧美在线观看| 亚洲av高清一区三区三区-久久人妻夜夜做天天爽| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| av网址在线直接观看-黄色av全部在线观看| 黄色av网站在线免费观看-亚洲欧美精品偷拍tv| 深夜三级福利在线播放-日韩精品一区二区在线天天狠天| 久久精品亚洲无中文东京热-日本妹子内谢视频一区| 国产在线一区二区三区欧美-久久偷拍精品视频久久| 久久精品人妻一区二区三区极品-久久99热这里只有精品免费| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 男人的天堂久久精品激情-最新亚洲精品a国产播放| 亚洲中文一二三av网-亚洲天堂成人免费在线|