国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁技術中心 > MKN-45 人胃癌細胞傳代技巧參考
產(chǎn)品目錄
MKN-45 人胃癌細胞傳代技巧參考
更新時間:2023-05-18 點擊量:663

MKN-45 人胃癌細胞

Human Gastric Cancer Cells ,MKN45

貨號:YJ-h345(STR鑒定)

價格: 1500.0

規(guī)格: 1*10 6

細胞介紹

該細胞系由S Akiyama建立,源于一位35歲患有印戒細胞癌的女性的胃淋巴結。

細胞特性

1 來源:女性,胃,胃淋巴結

2 形態(tài):圓形,貼壁和少量懸浮生長

3 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5 用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理:

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)半貼細胞和貼壁不牢(懸?。┘毎?/span>T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細胞的情況,若細胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代,傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收。

4備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1 準備RPMI-1640YJ-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達70%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,傳代可以參考以下方法:

1. 收集:將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mLT752-3mL)置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

MKN-45 人胃癌細胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫(yī)學實驗外包及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗代做服務:


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

精彩亚洲一区二区三区-中文字幕中文字幕在线色站| 91精品国产影片一区二区三区-欧美精品久久久精品一区二区| 欧美一区二区三区调教视频-三上悠亚国产精品一区二区三区| 中文字幕精品一区二区日本99-青青国产成人久久91网| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 欧美精品午夜一二三区-a屁视频一区二区三区四区| 亚洲欧美日韩二区三区-国产在线欧美一区日韩二区| 精品少妇一区二区18-一区二区三区日韩在线播放| 亚洲精品蜜桃在线观看-国产欧美日韩在线观看精品观看| 国产成人高清精品免费5388-好妞色妞在线视频播放| 欧美精品啪啪人妻一区二区-嫩草人妻舔舔羞羞一区二区三区| 97人妻精品一区二区三区爱与-日韩精品亚洲专区在线观看| 小12萝自慰喷水亚洲网站-chinese偷拍一区二区三区| 日韩高清在线观看一区二区-美产av在线免费观看| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区| 成人av一区二区蜜桃-亚洲色图激情人妻欧美| 熟女熟妇伦51788-国产av在线播放一区二区三区| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 中文字幕偷拍亚洲九色-亚洲视频不卡一区二区天堂| 亚洲国产精品一区二区av-日本一级黄色一区二区| 欧美一级二级三级在线看-日韩精品欧美嫩草久久99| 精彩亚洲一区二区三区-中文字幕中文字幕在线色站| 99久热精品免费观看四虎-亚洲天堂精品视频在线| 婷婷综合在线视频观看-亚洲一区二区三区香蕉| 日韩精品亚洲不卡一区二区-成人网在线视频精品一区二区三区| 亚洲精品激情一区二区-久久成人国产欧美精品一区二区| 久久亚州天堂一区二区-色噜噜色哟哟一区二区三区| 九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| 国产欧美日韩中文字幕在线-国产伊人一区二区三区四区| 欧美日韩亚洲1区2区-黄污视频在线观看不卡| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 国产一级片久久免费看同-麻豆精品尤物一区二区青青| 日韩毛片在线免费人视频-超碰中文字幕av在线| 亚洲国产视频不卡一区-激情欧美视频一区二区| 亚洲欧美激情自拍色图-国产亚洲精品sese在线播放| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 日韩精品一区二区三区十八-日韩人妻少妇一区二区三区| 亚洲av日韩五月天久热精品-国产日韩欧美一区二区三区群战| 天天干天天干2018-91人妻人人澡人爽精品| 中文字幕日韩精品不卡一区二区-成人av在线观看一区二区|