国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網站首頁技術中心 > SW756 人子宮鱗狀癌細胞傳代/復蘇技巧
產品目錄
SW756 人子宮鱗狀癌細胞傳代/復蘇技巧
更新時間:2024-03-30 點擊量:354

SW756 人子宮鱗狀癌細胞

,SW-756

貨號:YJ-h440(STR鑒定)

價格: 3000.0

規(guī)格: 1*106 

細胞特性

1  來源:人源,女 子宮;子宮頸

2  形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長

3  含量:>1x106  細胞數

4  規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。                      

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備

1) 準備L-15(推薦YJ-0009)培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,100%該細胞培養(yǎng)不能通入CO2,如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養(yǎng)箱的,可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來培養(yǎng),培養(yǎng)過程中每天將細胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二.細胞處理

1)凍存細胞的復蘇

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗技術及論文潤色服務,協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術服務:


滬公網安備 31011802001677號

亚洲午夜久久久精品影院-性感美女在线观看网站国产| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 亚洲黑人欧美一区二区三区-亚洲一区二区三区免费视频播放| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 99精品只有久久精品免费-蜜臀一区二区三区精品久久久| 日本中文字幕啊啊啊啊-久久精品伊人久久精品伊人| 熟妇勾子乱一区二区三区-欧美爱爱视频一区二区| av网址在线直接观看-黄色av全部在线观看| 日韩精品中文在线观看一区-亚洲bt欧美bt精品| 欧美日本亚一级二级三区久久精品-日韩欧美一区二区久久婷婷| 国产精品一区二区在线免费-久久精品国产亚洲av热明星| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 中文不卡一区二区三区-老司机在线老司机在线一区| 激情字幕久久久字幕中文-一区二区三区免费黄片| 国产精品一区二区在线免费-久久精品国产亚洲av热明星| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 黑丝av少妇精品久久久久久久-中文字幕久久久人妻无码| 99久热精品免费观看四虎-亚洲天堂精品视频在线| 精品国产综合一区二区三区-蜜臀一区二区三区刺激视频| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 色婷婷六月婷婷一区二区-91草草国产欧美在线观看| 在线免费观看黄片喷水-国产精品白丝网站在线观看| 日韩国产一区二区三区在线-精品日韩人妻少妇av| 乱入一二三免费在线观看-久久精品亚洲精品国产色婷婷| 婷婷六月视频在线观看-久久亚洲综合国产精品| 三上悠亚免费观看在线-青青草原在线视频观看精品| 欧美一级二级三级在线看-日韩精品欧美嫩草久久99| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 亚洲av日韩五月天久热精品-国产日韩欧美一区二区三区群战| 91蜜桃传媒一二三区-日韩欧美国产一区呦呦| 美女把腿张开给帅哥桶-无码无套少妇18p在线直播| 日韩精品亚洲不卡一区二区-成人网在线视频精品一区二区三区| 久久久精品欧美日韩国产-欧美精品乱码视频在线| 国模自慰一区二区三区-日韩一级黄色片天天看| 日本欧美在线视频观看-国产一区二区三区无码下载快播| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 精品亚洲卡一卡2卡三卡乱码-一区三区二插女人高潮在线观看| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片|