国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞傳代/復(fù)蘇操作
產(chǎn)品目錄
SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞傳代/復(fù)蘇操作
更新時(shí)間:2024-04-07 點(diǎn)擊量:340

SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞

Human synovial sarcoma cells ,SW-982

貨號(hào):YJ-h200(STR鑒定)

價(jià)格: 1500.0

規(guī)格: 1*106

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞系由A.Leibovitz 1974年從一名25歲的女性的滑膜肉瘤手術(shù)樣品中分離。

細(xì)胞特性

1 來(lái)源:人滑膜

2 形態(tài):混合樣

3 含量:>1x10^6  細(xì)胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5 用途:僅供科研使用。

運(yùn)輸和保存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

11mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?/span>45X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)半貼細(xì)胞和貼壁不牢(懸?。┘?xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況,若細(xì)胞密度在60%以下,客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),若細(xì)胞生長(zhǎng)70%-90%對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代,傳代時(shí)需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收。

4備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶12傳代 。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1 準(zhǔn)備L15(推薦YJ-0009)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,100%;該細(xì)胞培養(yǎng)不能通入CO2,如果沒(méi)有條件準(zhǔn)備空氣氣相100%的培養(yǎng)箱的,可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來(lái)培養(yǎng),培養(yǎng)過(guò)程中每天將細(xì)胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)70%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

該細(xì)胞輕微貼壁和懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞,傳代可以參考以下方法:

1. 收集:將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細(xì)胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。由于細(xì)胞貼壁不牢PBS潤(rùn)洗后細(xì)胞會(huì)脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T251-2mLT752-3mL)置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3. 將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來(lái)的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項(xiàng)

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開(kāi)始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| 欧美黄色三级视频网站-国产九九热视频在线观看| 两性污污视频网站在线观看-亚洲欧美日韩激情一区| 色综合色综合久久综合频道-埃及艳后黄版在线观看| 黄色av网站在线免费观看-亚洲欧美精品偷拍tv| 黄色美女网站大全中文字幕-欧美韩国日本一区二区| 欧美精品国产系列一二三国产真人-在线观看国产午夜视频| 久久夜色精品亚洲噜国产av-大香蕉伊人猫咪在线观看| 黄片黄片在线免费观看-激情综合网激情五月俺也去| 久色高清精品在线国产-国产精品视频一区三区四区| 青木玲高清中文字幕在线看-视频在线免费观看你懂的| 亚洲欧洲成视频免费观看-国产福利一区二区在线观看| 日韩亚洲一区二区三区av-欧美综合在线观看一区二区三区| 97香蕉久久国产在线观看-麻豆黄色广告免费看片| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 亚洲欧美日韩二区三区-国产在线欧美一区日韩二区| 成人免费资源在线观看-欧美国产日韩高清在线综合| 熟女熟妇伦51788-国产av在线播放一区二区三区| 日本中文字幕啊啊啊啊-久久精品伊人久久精品伊人| 极品人妻av在线播放-久久精品视频一区二区三区| 国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 男人的天堂久久精品激情-最新亚洲精品a国产播放| 亚洲精品蜜桃在线观看-国产欧美日韩在线观看精品观看| 中文字幕日韩精品不卡一区二区-成人av在线观看一区二区| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 成人免费资源在线观看-欧美国产日韩高清在线综合| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 国产在线一区二区三区欧美-久久偷拍精品视频久久| 日韩高清在线观看一区二区-美产av在线免费观看| 欧美精品国产白浆久久正在-国产精彩视频一区二区三区| 免费午夜福利在线观看-黄色日本黄色日本韩国黄色| 中文字幕日本在线资源-国产+成+人+亚洲欧洲自线| 三级a级一级大片在线观看-日韩av有码免费观看| 人妻日韩精品中文字幕图片-麻豆极度性感诱人在线露脸| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 91精品国产无线乱码在线-999精品视频免费看| 亚洲精品一区网站在线观看-黄页视频免费观看网站| 97人妻精品一区二区三区爱与-日韩精品亚洲专区在线观看| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区|