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產(chǎn)品目錄
間充質(zhì)干細胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒產(chǎn)品介紹
更新時間:2024-08-27 點擊量:350

間充質(zhì)干細胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒

,成軟骨誘導(dǎo)液

貨號:YJ-MSCYD-003

價格: 2880.0

規(guī)格: 200ml

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品為團隊精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒,可增強間充質(zhì)干細胞向成軟骨細胞分化的能力。

本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

產(chǎn)品組成成分及保存

試劑名稱

體積

保存條件

有效期

地塞米松

20μL

-20℃

1 Year

脯氨酸

200μL

-20℃

1 Year

抗壞血酸

600μL

-20℃

1 Year

TGF-β1

2mL

-20℃

1 Year

丙酮酸鈉

2mL

-20℃

1 Year

ITS 添加物

2mL

-20℃

1 Year

雙抗

2mL

-20℃

1 Year

胎牛血清

20mL

-20℃

1 Year

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

200mL

2-8℃

1 Year

甲苯胺藍染色液

5mL

RT(室溫)

1 Year

注意:

1.為保證產(chǎn)品的有效性,請避免反復(fù)凍融。

2.現(xiàn)用現(xiàn)配,配制好的預(yù)混液保存于2-8℃,有效期1 month;配制好的完全培養(yǎng)基保存于2-8℃,有效期12 hours.

產(chǎn)品使用說明

1. 成軟骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制

室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后,瞬時離心,使溶液集中于離心管底部。

(注意:若因子或血清中有沉淀物,屬正?,F(xiàn)象,無須過濾,避免成分丟失。)

根據(jù)實驗用量,于無菌操作臺中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,建議每次配制50mL,配制比例見下表:

試劑成分

配制比例

50mL配制體系

地塞米松

0.01%

5μL

脯氨酸

0.1%

50μL

抗壞血酸

0.3%

150μL

TGF-β1

1%

500μL

丙酮酸鈉

1%

500μL

ITS 添加物

1%

500μL

雙抗

1%

500μL

胎牛血清

10%

5mL

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

補充至所需體積

補充至總體積為50mL

2. 成軟骨誘導(dǎo)分化實驗步驟

建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細胞,將其消化下來,離心收集,使用間充質(zhì)干細胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度為1~5×105cell/mL,均勻鋪于6孔板中,每孔2mL,置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

(注意:此處細胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例,若為其它培養(yǎng)器皿,請根據(jù)實際情況調(diào)整細胞密度及培養(yǎng)液體積。)

待細胞匯合度達80%~100%時,即可進行誘導(dǎo)分化。

小心吸棄細胞培養(yǎng)上清,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基,每孔2mL,置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

(注意:完全培養(yǎng)基加入細胞前需提前置于37℃預(yù)熱。)

2day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時,若細胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色,是由于細胞量較大,培養(yǎng)基消耗較快導(dǎo)致的,請及時調(diào)整為每日換液。

(注意:完全培養(yǎng)基加入前需提前置于37℃預(yù)熱。)

細胞誘導(dǎo)3周后,即可進行甲苯胺藍染色鑒定。

3. 甲苯胺藍染色分析

細胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后,小心吸棄細胞培養(yǎng)上清,1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細胞固定液(4%中性甲醛溶液等),室溫固定30 min

吸棄細胞固定液,1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入甲苯胺藍染色液,每孔1mL,室溫染色30min。

(注意:染色液底部可能會有沉淀,吸取時盡量不要觸及底部。若染色后有沉淀,1×PBS洗去即可。)

吸出染色液,1×PBS潤洗,去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果,背景呈淡藍色,成軟骨細胞呈紫紅色。

(注意:染色液可重復(fù)使用,建議收集。)

間充質(zhì)干細胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒產(chǎn)品介紹

質(zhì)量控制

無菌檢測(細菌、真菌和支原體檢測)

pH測試

滲透壓檢測

內(nèi)毒素

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注意事項

僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術(shù)服務(wù):



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