国产日韩欧美不卡在线,久久99久久精品久久久久久清纯,亚洲午夜精品伦理一区,欧美精品久久七十五区

網(wǎng)站首頁(yè)產(chǎn)品展示實(shí)驗(yàn)代做酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn) > PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類:酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-30

簡(jiǎn)要描述:[平臺(tái)項(xiàng)目開展范圍]慢病毒,腺病毒,RNAI類, 分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),芯片類實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。

詳細(xì)說(shuō)明:

PKC活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

 

實(shí)驗(yàn)試劑:瓊脂糖(Promega公司,V3125) ;其他常備試劑購(gòu)自sigma公司; PKC活性檢測(cè)試劑盒

(Promega公司,V5330)

實(shí)驗(yàn)儀器:電泳儀(北京六一廠,112-0640) ;水平電泳槽(北京六一廠,122-3146) ;電熱恒溫培養(yǎng)箱(碧云天生物,EBI025) ;電熱恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠,HH-8)

基本原理:分離PKC蛋白(磷酸化蛋白及非磷酸化蛋白),利用試劑 盒組分將2種蛋白分離并加以區(qū)分,利用電泳瓊脂糖凝膠技術(shù)顯示2種不同的蛋白,利用分析軟件將顯示的不同蛋白定量并加以比較,以磷酸化PKC非磷酸化PKC灰度值IOD的比值顯示PKC活性(PKC活化度)。

 

操作步驟:

1.用預(yù)冷的勻漿器把細(xì)胞勻漿。

2.在4°C,用14,000 xg離心裂解液5分鐘,保存上清。

3.用PKC抽提液預(yù)平衡1ml的DEAE纖維素柱,再把第2步中得到的上清過(guò)柱。用5m的PKC抽提液洗柱子,然后用5ml含有200mM NaCI的PKC抽提液洗脫含有PKC的組分。

4.用PKC稀釋液(PKC dilution buffer)將少量蛋白激酶C (Promtein Kinase C)稀釋到2 .5ug/ml.隨試劑盒所附的產(chǎn)品信息中標(biāo)有這個(gè)酶的初始濃度。

5.用探頭超聲波破碎儀超聲處理PKC Activator Solution 20-30秒,或直到溶液變溫暖。

6.對(duì)每一個(gè)樣品,按照下面所列順序在0.5ml小離心管中混合PepTag@ PKC 5x Buffer,PepTag@ C1Peptide,超聲過(guò)的PKC Activator 5X Solution,和水。在樣品加入之前,小離心管-直要放在冰上。陰性對(duì)照將用于對(duì)反應(yīng)進(jìn)行定量時(shí)確定其摩爾吸收值(說(shuō)明書第IV.部分) 。

 

標(biāo)準(zhǔn)PKC檢測(cè)

PepTag@ PKC Reaction 5X Buffer           5ul

PepTag@ C1 Peptide (0.4ug/ul)            5ul

PKC Activator 5X Solution,超聲處理的      5ul

短肽保護(hù)液(非必須)                    1ul

樣品                                 9ul

去離子水使終體積為                   25ul

 

PKC陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)

PepTag⑧PKC Reaction 5X Buffer          5ul

PepTag@ C1 Peptide (0 4ug/ul)           5ul

PKC Activator 5XSolution,超聲處理的      5ul

短肽保護(hù)液(非必須)                   1ul

Protein Kinase C (2.5ug/ml溶于PKC dilution bufer)     4ul

去離子水使終體積為                  25ul

 

PKC陰性對(duì)照檢測(cè)(不加PKC)

PepTag@ PKC Reaction 5X Buffer         5ul

PepTag@ C1 Peptide (0 4ug/ul)          5ul

PKC Activator 5XSolution,超聲處理的     5ul

短肽保護(hù)液(非必須)                  1ul

去離子水使終體積為               25ul

 

7.在0時(shí)間點(diǎn),把-支管子從冰上移到30°C水浴中孵育2分鐘。然后加入樣品或蛋白激酶C在30°C再孵育30分鐘。

8.把管子放進(jìn)開水浴或95°C加熱塊10分鐘以終止反應(yīng)。在凝膠電泳前把樣品-直避光存放在4°C或-20°C。

9.把樣品上樣到膠上之前,往每個(gè)樣品中加進(jìn)1ul的80%甘油,以確保樣品保留在上樣孔中(說(shuō)明書第II.F部分)。

10.每孔點(diǎn)樣10ul,在0. 8%瓊脂糖凝膠上以100V電泳15分鐘分開樣品,拍照。

 

檢測(cè)結(jié)果:

說(shuō)明:后面2組泳道“陽(yáng)性(PC)"和“陰性(NC)"為試劑盒自帶系統(tǒng)對(duì)照。

注:陽(yáng)性條帶以Gel pro4版凝膠光密度分析軟件進(jìn)行分析,測(cè)其IOD (integrated optical density)累積光密度參考值。按照百分比例計(jì)算PKC活性百分比

(以陽(yáng)性對(duì)照I0D值為100,其余各組的PKC+ p-PKC總和為100分配IOD數(shù)值)

 

 

 

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:

歡迎咨詢?cè)斦?,我們?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來(lái)電詳詢!

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測(cè)

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說(shuō)明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

電話咨詢
  • 服務(wù)熱線:
  • 400-665-0203
日本少妇激情一区二区-亚洲自偷自拍熟女另类蜜臀| 国产精品二区高清在线-91精品91久久久久久| 日韩亚洲一区二区三区av-欧美综合在线观看一区二区三区| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 婷婷六月视频在线观看-久久亚洲综合国产精品| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 国产欧美成人精品第一区-日本黄色精品一区二区| 在线成色中文综合网站-国产二区精品视频在线观看| 国产av剧情护士麻豆-三级国产精品欧美在线观看| 天天干天天日天天射天天舔-精品香蕉视频官网在线观看| 国产传媒中文字幕在线观看-午夜福利视频在线播放观看| av噜噜国产在线观看-欧美视频亚洲视频一区二区三区| 一级小黄片在线免费看-亚洲欧美午夜情伊人888| 中文字幕社区电影成人-欧美精美视频一区二区三区| 熟妇勾子乱一区二区三区-欧美爱爱视频一区二区| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 日韩精品亚洲不卡一区二区-成人网在线视频精品一区二区三区| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 色噜噜噜噜一区二区三区-欧美最猛黑人做爰视频| 成人av一区二区蜜桃-亚洲色图激情人妻欧美| 亚洲中文一二三av网-亚洲天堂成人免费在线| 91亚洲美女视频在线-熟妇人妻精品一区二区三区蜜臀| 哦啊好大用力欧美视频-麻豆国产传媒片在线观看| 国产午夜精品理论片A级漫画-久久精品国产99亚洲精品| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 午夜福利院免费在线观看-久久精品日产第一区二区三区画质| 亚洲一区精品一区在线观看-日本久久久一区二区三区| 亚洲国产视频不卡一区-激情欧美视频一区二区| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 国产一区二区三区四区五区麻豆-欧美一级在线视频播放| 一区二区三区国产高清mm-美女张开腿让帅哥桶爽| 久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 少妇一区二区三区粉嫩av-国产精品区久久久久久久| 亚洲欧美一区二区中文-台湾中文综合网妹子网| 亚洲日本一区二区三区黄色电形-中文字幕乱码免费熟女| 一级小黄片在线免费看-亚洲欧美午夜情伊人888| 天天干天天干2018-91人妻人人澡人爽精品| 91蜜桃传媒一二三区-日韩欧美国产一区呦呦| 午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 欧洲精品一区二区三区中文字幕-91久久国产综合久久蜜月精品|