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雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)

雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-30

簡(jiǎn)要描述:[雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)]慢病毒,腺病毒,RNAI類, 分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn),芯片類實(shí)驗(yàn),并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計(jì)指導(dǎo)、基金申請(qǐng)指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。

詳細(xì)說(shuō)明:

雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)

 

 

實(shí)驗(yàn)意義

 

1.可廣泛引用與miRNA的靶基因檢測(cè),可以判斷miRNA是否與靶基因結(jié)合,也可以定量反映miRNA對(duì)目的基因的抑制作用。

 

2.轉(zhuǎn)錄因子(反式作用因子)存在DNA結(jié)合域,可以與靶標(biāo)啟動(dòng)子中的特異序列(順式作用元件)進(jìn)行共價(jià)結(jié)合,從而調(diào)控基因的表達(dá),雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)是檢測(cè)這類轉(zhuǎn)錄因子與基因特異序列的重要手段,是真核基因表達(dá)調(diào)控研究的常用方法。

 

實(shí)驗(yàn)原理及流程

雙熒光素酶是指螢火熒光素酶和海腎熒光素酶,螢火蟲(chóng)熒光素酶呈黃綠色,波長(zhǎng)550-570nm, 海腎熒光素酶呈藍(lán)色,波長(zhǎng)為480nm。報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)是將靶標(biāo)啟動(dòng)子的特定片段插入熒光素酶表達(dá)序列的前方,構(gòu)建帶有靶標(biāo)啟動(dòng)子片段的雙報(bào)道基因質(zhì)粒,然后將待測(cè)的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒與報(bào)告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞或者其他相關(guān)細(xì)胞系,如果轉(zhuǎn)錄因子能夠激活

啟動(dòng)子,則報(bào)告基因表達(dá),熒光素酶的表達(dá)量與轉(zhuǎn)錄因子作用強(qiáng)度成正比。加入熒光素酶底物即可根據(jù)熒光強(qiáng)度檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子與靶啟動(dòng)子之間是否存在相互作用。熒光素酶報(bào)告基因可構(gòu)建在同一質(zhì)?;蛘邩?gòu)建為兩個(gè)質(zhì)粒,即轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒與靶啟動(dòng)子片段質(zhì)粒。

 

實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

實(shí)驗(yàn)周期: 4-6周

交付標(biāo)準(zhǔn):雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)、鑒定結(jié)果報(bào)告、分析報(bào)告、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、 耗材.實(shí)驗(yàn)步驟)、原始數(shù)據(jù)等

 

需確認(rèn)的信息

1.基因與啟動(dòng)子信息

2.具體分許信息.

3.是否提供質(zhì)粒?

 

參考文獻(xiàn)

[1] Miraglia E , Nylen, Frank, Johansson K,et al. Entinostat up-regulates the CAMP gene encoding LL-37 via activationof STAT3 and HIF-1a transcription factors[J]. Scientific Reports, 2016, 6:33274.

[2] Azimzadeh P,Olson J A,Balenga N . Reporter gene assays for investigating GPCR signaling.[J]. Methods Cell Biol,2017:89-99.

 

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:

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實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測(cè)

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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