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RNA Pulldown、DNA Pull-down

RNA Pulldown、DNA Pull-down

產(chǎn)品型號(hào):

所屬分類(lèi):免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-30

簡(jiǎn)要描述:RNA Pulldown、DNA Pull-down
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
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詳細(xì)說(shuō)明:

RNA Pulldown、DNA Pull-down

 

 

實(shí)驗(yàn)意義

 

核酸與蛋白質(zhì)的互作是細(xì)胞功能的核心,包括蛋白質(zhì)合成、mRNA組裝等生命活動(dòng)中重要的代謝過(guò)程,研究核酸與蛋白質(zhì)的互作是研究生命科學(xué)的基本工具。

 

實(shí)驗(yàn)原理及步驟

RNA Pull-down:通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄RNA并用生物素進(jìn)行標(biāo)記,然后與胞漿蛋白混合物共同孵育形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物,然后用鏈委親和素標(biāo)記的磁珠分離純化該復(fù)合物(利用生物素與鏈霉親和素的非共價(jià)親和作用)。洗脫后進(jìn)行檢測(cè),如果檢測(cè)蛋白為已知蛋白可通過(guò)WB進(jìn)行鑒定,如果檢測(cè)未知蛋白則可以結(jié)合質(zhì)譜進(jìn)行鑒定。流程為提取細(xì)胞胞漿蛋白樣品液- -體外轉(zhuǎn)錄合成生物素標(biāo)記RNA-共孵育_ -磁珠純化- -洗脫得到互作蛋白. -WB或質(zhì)譜鑒定。

DNA Pull-down:通過(guò)合成標(biāo)記有生物素的DNA+*片段,與細(xì)胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物,然后用鏈垂親和素磁珠純化,WB或者質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)鑒定。流程為提取核蛋白樣品液- -合成生物素標(biāo)記DNA-共孵育- -磁珠純化- ~洗脫得到互作蛋白- -WB或質(zhì)譜鑒定。

 

結(jié)果展示

RNA Pull-down

 

 

 

 

DNA Pull-down .

 

 

 

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1.實(shí)驗(yàn)周期: 1-2個(gè)月

2.交付標(biāo)準(zhǔn):

RNA Pull-down:探針序列、X光片.實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)

DNA Pull-down:探針序列、X光片.實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟.試劑、儀器等)

 

需確認(rèn)信息

1.目的基因種屬及ID號(hào)

2.基因序列信息

3.樣本種屬及類(lèi)型

4.樣本數(shù)量.

5.分析要求

參考文獻(xiàn)

[1]Chen R,Liu Y,Zhuang H,et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts withDBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.

[2]Tran D H , Shishido Y,Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking regionof the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis andmass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測(cè)

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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